玻璃層析柱裝柱的技巧和使用注意事項
釋出時間◕│:2022-11-17 點選次數◕│:202
玻璃層析柱適用於分子篩▩◕、離子交換▩◕、凝膠滲透與親和層析╃◕↟▩₪。隨著液相層析法進入血液製品生產▩•,利用層析法▩•,可純化血漿中多種蛋白▩•,例如白蛋白等等╃◕↟▩₪。越來越多生產單位相繼使用▩•,效果甚佳▩•,甚為滿意╃◕↟▩₪。
玻璃層析柱裝柱的技巧◕│:
柱層析的裝柱非常重要▩•,裝柱的效果會直接影響層析分離效果╃◕↟▩₪。有溼法裝柱和幹法裝柱等兩種方法╃◕↟▩₪。溼法裝柱很簡單▩•,使用也較普遍▩•,就是先用比固定相多一倍的洗脫劑將固定相活成勻漿▩•,柱子底部先用脫脂棉塞緊▩•,然後倒入洗脫劑將脫脂棉中氣泡趕出╃◕↟▩₪。
用漏斗將活好的固定相倒入柱子中▩•,開啟底部活塞▩•,將柱子中高出固定相的溶劑放出╃◕↟▩₪。期間不斷用橡皮棒敲打▩•,將固定相敲實▩•,做到密實均勻無氣泡即可╃◕↟▩₪。
很多時候用加壓的方法可以很高效地裝好柱子▩•,而且在柱子中沒有氣泡產生╃◕↟▩₪。
幹法裝柱與溼法裝柱剛好相反的是▩•,它是將乾燥的吸附劑從柱子上端直接加入到一個空的柱子中▩•,然後用油泵抽柱子底部▩•,相當於減壓過柱▩•,直到柱子變得很結實▩•,再用淋洗劑“走柱子”╃◕↟▩₪。
幹法裝柱的一個缺點就是在裝入洗脫劑後▩•,由於溶劑和固定相之間的吸附放熱▩•,所以柱子容易變花▩•,影響分離效果╃◕↟▩₪。
玻璃層析柱使用注意事項◕│:
1▩◕、除氯化的碳氫化合物╃◕↟▩₪。丙酮▩◕、酮類化合物▩◕、脂肪族脂和苯酚之外▩•,其他的所有有機溶劑均可適用╃◕↟▩₪。
2▩◕、禁止使用氫氧化鈉▩•,鹽酸或醋酸溶液▩•,因上述溶液會損壞尼龍網篩╃◕↟▩₪。